Современный метод диагностики туберкулеза

Анализ результатов теста

Результат анализа квантиферонового теста оценивается как положительный, отрицательный и сомнительный. При этом оцениваются нюансы результатов.

1. Положительный результат говорит об инфицировании палочкой Коха, а также не туберкулёзными инфекциями типа M. kansasii, M. marinum M. szulgai.
2. Отрицательный результат, во-первых, не исключает туберкулёзной инфекции. Во-вторых, возможен ложноотрицательный результат при иммунодефицитных заболеваниях, несоблюдении правил подготовки к анализу или в ранние сроки туберкулёза. Ложноотрицательный ответ в ряде случаев наблюдается у детей до 5 летнего возраста.
3. Сомнительный результат трактуется как чувствительность к ТВ-антигену, который использовался во время анализа. При нарушении правил подготовки к анализу тоже возможен сомнительный результат.

В сомнительных случаях врачи назначают дополнительные методы обследования на туберкулёз или рекомендуют повторное проведение анализа.

Интерпретация результата

Если квантифероновый тест положительный, это говорит об инфицировании организма туберкулёзной палочкой. Но это не означает, что человек болен туберкулёзом.

туберкулёз

Тест выявляет следующие виды инфицирования:

• активная форма туберкулёза;
• скрытая (латентная) форма туберкулёзной инфекции.

При этом он не дифференцирует (не различает) активную или скрытую форму инфекции, а также пролеченный туберкулёз. Это объясняется тем, что квантифероновый тест показывает уровень гамма-интерферона. Однако только по величине уровня гамма-интерферона нельзя судить о степени и стадии туберкулёзной инфекции. Расшифровку результатов квантиферонового теста проводит врач-фтизиатр только в сопоставлении с клиническими и эпидемиологическими данными. В случае положительного результата фтизиатр для уточнения диагноза использует дополнительные лабораторные и рентгенологические данные.

Что лучше — квантифероновый тест или «Диаскинтест»

В сравнении с квантифероновым для постановки «Диаскинтест» имеются противопоказания:

• аллергические заболевания;
• индивидуальная непереносимость;
• ОРВИ и ОРЗ в день проведения «Диаскинтест»;
• период карантина в детских учреждениях.

Квантифероновый метод имеет следующие преимущества перед «Диаскинтест»:

• нет противопоказаний;
• возможность проведения в любое время, в том числе во время карантина;
• высокая чувствительность 89% и специфичность 99%;
• на результат анализа не влияет прививка БЦЖ;
• после теста невозможны аллергические реакции.

Недостаток квантиферонового теста перед «Диаскинтест» — он показывает инфицирование микобактериями туберкулёза, но не выявляет активность и степень процесса. Для выяснения стадии туберкулёза нужна туберкулиновая проба.

Показания

Квантифероновый тест показан для массовой диагностики туберкулёза у лиц высокой группы риска:

• работникам туберкулёзных диспансеров;

• людям после контакта с туберкулёзным больным;
• лицам с положительной пробой Манту для исключения реакции после БЦЖ;
• ВИЧ-инфицированным лицам;
• людям с противопоказаниями для кожных проб;
• лицам с алкогольной зависимостью и наркоманам;
• лицам с высоким риском развития аллергии на туберкулиновую пробу;
• пациентам с иммунодефицитными заболеваниями;
• больным с онкологическими и аутоиммунными болезнями;
• реципиентам после пересадки лёгкого;
• тест делают иммигрантам для диагностики инфекции.

Квантифероновый тест делают в тех случаях, когда требуется выявление туберкулёзной инфекции после получения сомнительных результатов пробы Манту или «Диаскинтест». Метод используется для выявления туберкулёза в детских учреждениях во время карантина. Также тест применяют для выявления инфекции у лиц из группы риска — медицинских работников отделений ВИЧ-инфицированных, тубдиспансеров, больничных тюрем, людям с противопоказаниями для туберкулиновой пробы. Квантифероновый тест не используется как заключение, а оценивается врачом с учётом анамнеза и клинической картины пациента.

Туберкулиновые пробы

Заражение выявляют с помощью введения под кожу препарата с названием Туберкулин, который впервые был получен в 1890 г. Робертом Кохом из культуры .

В состав Туберкулина входят низкомолекулярные белки, нуклеиновые кислоты, липиды, полисахариды, получившиеся при разрушении микобактерий.

Диагностические проводят всем, кроме новорожденных, перед введением вакцины БЦЖ. При положительном результате прививку БЦЖ не делают из-за риска осложнений.

Подкожная проба Коха

Первоначально Туберкулин вводили подкожно под лопатку. Для получения результата должно было пройти 48-72 часа. В месте укола за это время появлялась папула, а у пациента повышалась температура, ухудшалось самочувствие.

Если организм бурно реагировал на подкожную пробу, то предполагалось, что человек заражен палочкой Коха (микобактериями). При отсутствии реакции человек считался здоровым.

Накожная проба Пирке

В 1907 г. врачом К. Пирке был предложен скарификационный метод. Для его проведения использовалась вытяжка из сухого очищенного туберкулина.

При проведении исследования:

• кожу предплечья обрабатывают карболовой кислотой;
• наносят царапину глубиной 5 мм;
• капают раствор туберкулина.

Оценка теста проводится через 2-3 суток. Положительный результат пробы у детей до 3 лет означает активную стадию болезни. После 3 лет положительная накожная проба указывает на первичное заражение микобактерией.

Внутрикожная проба Манту

Усовершенствовал пробу Пирке в 1908 г. доктор Ш. Манту. Пробу Манту ставят на предплечье, Туберкулин вводят внутрь кожи, что позволило исключить возможность воспаления накожной царапины.

По величине папулы делают вывод о состоянии противотуберкулезного иммунитета.

Для детей, которые проходили вакцинацию БЦЖ меньше года назад, нормальным считается .

Как проводится диагностика?

Для пациента исследование, как медицинская манипуляция, проводится весьма просто и безболезненно.

Лаборант осуществляет забор венозной крови, которая разделяется по трём стерильным пробиркам.

Выбор количества пробирок продиктован из соображений обеспечения достоверности диагностики и исключения ложных результатов.

Забор пробы крови производят натощак как у детей, так и у взрослых.

Должно пройти как минимум 8 часов после последнего приема пищи, иначе вероятность ложного результата будет неприемлемой.

Исследование имеет три результата:

1. отрицательный;
2. положительный;
3. сомнительный.

Несложно догадаться, что при положительном результате — вы больны туберкулезом, а при отрицательном — нет.

Для увеличения достоверности клиники могут предложить повторную диагностику сразу после проведения первичной, что, кстати, является его неоспоримым преимуществом, так как многие диагностические тесты требуют определенной паузы, прежде чем станет возможно их повторное проведение.

Показания к проведению

Применение квантиферонового теста показано следующим категориям граждан:

• независимо от этиологии пациентам с иммунодефицитом;
• пациентам с возможностью аллергических реакций;
• людям с онкологическими и аутоимунные заболеваниями.
• наркозависимым и лицам с алкогольной зависимостью;
• пациентам с сахарным диабетом, эпилепсией и иными серьёзными диагнозами в анамнезе;
• людям с индивидуальной непереносимостью туберкулина;
• пациентам после трансплантации легкого;
• ВИЧ-инфицированным;

В случае получения пограничных результатов диагностики туберкулеза, связанных с вашей принадлежностью к вышеперечисленным группам людей, проведение квантиферонового теста становится неотъемлемой частью диагностики организма, т.к. вероятность присутствия инкубационной формы туберкулеза высока.

Опасен ли тест?

Большинство людей беспокоит вопрос дискомфорта, связанного с проведением лабораторной диагностики туберкулеза.

В случае с квантифероновым тестом не стоит этого опасаться.

Для достоверного результата необходима лишь одна составляющая — гамма-интерферон, который в изобилии содержится в крови человека.

Забор венозной крови происходит быстро и не сопровождается длительным дискомфортом.

Вторым доводом может служить определенный процент вероятности, что прививка БЦЖ, сделанная накануне, может исказить результаты в заключении.

Решение данной проблемы заключается в выдержке паузы между данными процедурами.

Достаточно одного месяца, чтобы свести к минимуму возможность ложного результата.

Сравнение с диаскинтестом и другими методами

Диагностика туберкулеза – довольно сложный процесс, поэтому категорично сказать, что лучше, – проба Манту, диаскинтест или квантифероновый тест – невозможно и неправильно.

Преимуществом реакции Манту является выявление туберкулеза на очень ранней стадии, когда диаскинтест и метод IGRA будут отрицательными. Недостаток туберкулинодиагностики – высокая частота (30-50%) ложноположительных результатов ввиду аллергии и индивидуальных особенностей, а также реагирование на БЦЖ.

Сравнение диагностических методик

Чаще всего диагностическая тактика сводится к тому, что при вираже Манту выполняют диаскинтест и квантифероновый анализ. В случае отрицательного диаскинтеста и положительного IGRA рекомендуют через 6-8 недель пересдать диаскинтест. Если он по-прежнему будет отрицательным, это подтвердит факт инфицирования, а не активной формы болезни, и оправдает положительный квантифероновый анализ. В таком случае профилактическое лечение не назначается.

Тесты на основе белков туберкулезных бактерий

Стратегия ВОЗ по туберкулезу направлена на снижение смертности от него к 2035 г. на 95%. Условием снижения смертности является ранняя диагностика инфицирования. С этой целью созданы новые точные методы определения присутствия туберкулезных микобактерий в организме человека.

Созданы способы выявления инфекции с помощью Диаскинтеста, Квантиферона, Тубинферона.

Диаскинтест и Тубинферон вводятся внутрь кожи. Для проведения берут кровь пациента и проводят исследование в пробирке.

Квантифероновый метод и Диаскинтест отличаются более высокой чувствительностью к микобактериям, чем туберкулиновые пробы при тестировании детей и взрослых, вакцинированных БЦЖ.

При отсутствии вакцинации БЦЖ более точным оказывается туберкулиновая проба Манту.

Диаскинтест

Прогноз болезни улучшается при диагностике на стадии ранних симптомов болезни с помощью экспресс-тестов на туберкулез. В аптеке можно приобрести ИммуноХром-анти-МТ-Экспресс и, следуя инструкции, выполнить его в домашних условиях самостоятельно.

Точным способом выявления туберкулеза является Диаскинтест. При проведении пробы вместо туберкулина внутрикожно вводят смесь из белков CFP-10, ESAT-6.

Исследование назначают для уточнения результатов пробы Манту. Результаты проверяют через 3 суток.

Положительный результат указывает на стадию первых признаков заражения или активной фазы болезни. Диаскинтест редко дает ошибочные результаты, так как отличается высокой специфичностью к M. tuberculosis.

Тубинферон

Тубинфероновый метод разработан в России. Под кожу вводится смесь очищенного туберкулина и белков CFP-10, ESAT-6. С помощью тубинферонового теста можно выявить заражение туберкулезом.

Тубинферон чувствительнее, чем другие методы при выявлении скрытой туберкулезной инфекции, что важно для улучшения прогноза заболевания. Чем раньше будет начато лечение такими сильными антибиотиками, как Рифампицин, Диоксидин, Изониазид, тем выше вероятность полного выздоровления

Чем раньше будет начато лечение такими сильными антибиотиками, как Рифампицин, Диоксидин, Изониазид, тем выше вероятность полного выздоровления.

Квантиферон

Проводится квантифероновый тест на туберкулез вне организма и позволяет обнаружить заболевание, протекающее в скрытой и активной форме. Главное его преимущество – незначительный риск ложноположительных результатов и отсутствие их у людей, вакцинированных БЦЖ.

Для исследования необходима цельная кровь, в которой есть T-лимфоциты. Если пациент был инфицирован туберкулезом, то T-лимфоциты при встрече с белками микобактерии начинают активно выделять гамма-интерферон. По количеству выделенного гамма-интерферона определяют тяжесть инфекции.

Чтобы провести гамма-интерфероновый тест на туберкулез:

• берут кровь из вены;
• добавляют образцы в 3 пробирки с белками CFP-10, ESAT-6;
• ожидают реакцию T-лимфоцитов;
• определяют количество синтезированного гамма-интерферона в пробирке.

С использованием квантиферонового теста достигает точности 99,1%. А проведение исследования вне организма исключает риск побочных эффектов и аллергической реакции.

1. Пробу Манту можно сделать за 400-700 руб.
2. Цена Квантиферона составляет 1900-3500 руб.
3. Экспресс-тест на туберкулез ИммуноХром-анти-МТ-Экспресс стоит 400 руб.

К положительным сторонам Квантиферона относится отсутствие противопоказаний, высокая специфичность и отсутствие зависимости от календаря детских прививок.

Метод можно использовать для проверки на , которым противопоказано проведение туберкулиновой пробы.

Вне организма можно проводить диагностику туберкулезного инфицирования Хайн-тестом. Этот метод выявляет ДНК микобактерии в мокроте. Недостаток исследования в отсутствии различий между живыми и погибшими палочками Коха, что не позволяет использовать Хайн-тест для контроля лечения.

Для определения активной формы заболевания используются иммунохроматографический экспресс-тест SD BIOLINE для выявления белка MPT64, который вырабатывается микобактериями. Иммунологический способ диагностики позволяет идентифицировать с точностью 98,5-100%.

Несмотря на высокую специфичность тестов, основанных на выявлении белков микобактерий, окончательный диагноз ставит фтизиатр, основываясь на результатах нескольких видов лабораторных исследований крови, мочи и мокроты.

Результаты квантиферонового теста

Результат заключения, который возможно получить на руки после проведения исследования может быть: отрицательным, положительным или сомнительным.

При вынесении заключения учитывается дополнительная оценка анамнеза и нюансов проведения диагностики туберкулеза.

1. Отрицательный результат не исключает присутствия туберкулёзных антигенов. Он возможен в случаях, что вы не соблюдали предтестовые рекомендации: принимали пищу, алкоголь, наркотические вещества и лекарства. С большой долей вероятности, тест будет ложноотрицательным в ранние сроки развития туберкулеза или если пациент ВИЧ+. Детям младше 5 лет требуется повторная диагностика для исключения ложных анализов.
2. Положительный результат констатирует факт инфицирования организма палочкой Коха, либо рядом нетуберкулезных инфекций, которые требуется диагностировать дополнительно.
3. Сомнительное заключение может трактоваться — как повышенная чувствительность к реагентам, применяемым при квантифероновом тесте на туберкулез. Игнорирование предтестовых рекомендаций также может привести к сомнительным показаниям теста, что создаст необходимость повторной сдачи крови.

При малейших подозрениях и сомнениях лечащий врач вправе назначить дополнительные исследования вашего организма, что не будет лишним, учитывая серьёзность вероятного диагноза.

Как производится тест?

Для того чтобы сделать квантифероновый тест, нужно прийти в кабинет забора крови. При необходимости с собой принести стерильные одноразовые перчатки, вату, спирт (обычно ничего не нужно).

Медсестра берет необходимое количество крови и помещает в специальные пробирки.

Существует особый комплект, который используется именно для квантофероновых тестов. В общей сложности их три. В них материал находится необходимое количество времени.

Кровь помещается в пробирку Antigen (сюда вводятся МБК). Тут будет видно наличие гамма-интерферона у инфицированного человека. В пробирках Mitogen и Nil  проверяется нормальная реакция иммунных клеток относительно выработки интерферона. Результат оценивается в совокупности.

После всего вышеперечисленного делается компьютерная обработка полученных результатов.

Но что именно предполагает квантифероновый тест и как его делают? Суть процесса в следующем:

1. Собирается кровь в объеме 1 мл и распределяется по пробиркам.
2. Производится перемешивание, инкубирование при 37-ми градусах по Цельсию на протяжении 15-24-х часов.
3. Материал обрабатывается на центрифуге в течение четверти часа.
4. Плазма может храниться в холодильной камере около месяца.
5. В лунки вносятся меченные ферментом антитела и сам антиген, после производится инкубирование на протяжении двух часов. Температура при этом должна быть комнатной.
6. В результате расчет производится с использованием компьютерных технологий.

Недостатки

Помимо положительных характеристик можно выделить и минусы способа. Это:

• есть вероятность ложноотрицательного результата, так как чувствительность метода средняя;
• в некоторых случаях наблюдается ложноположительный результат (после проб Манту или диаскинтеста);
• доступна данная диагностика не во всех городах и клиниках;
• анализ относится к дорогостоящим (стоимость варьируется от 3000 до 5000 рублей);
• не различает латентную и активную форму патологии (определяет их одинаково).

Такой анализ недоступен в государственных поликлиниках на бесплатной основе. Если больной желает пройти данную диагностику, то ему придется оплатить ее из собственного кошелька. Сумма значительная, а если проведенная манипуляция окажется лживой, то придется делать повторный тест, а это дополнительная трата денег, нервов и времени.

Показания

Приблизительно 30% населения планеты имеют скрытую туберкулезную инфекцию – это означает, что люди инфицированы микобактериями, но симптомы болезни отсутствуют. Снижение иммунитета приводит к активизации возбудителей туберкулеза, бактериовыделению и распространению палочек Коха среди других людей. Поэтому и участковые терапевты, педиатры, и семейный доктор рекомендуют выполнять квантифероновый тест как скрининговый метод достоверного выявления скрытой формы туберкулеза.

Скрининг латентной формы туберкулеза проводится среди детей, подростков, а также взрослых, входящих в группу риска по туберкулезу.

Лица, относящиеся к группе риска среди взрослых:

• медицинские работники;
• люди, контактирующие с больным туберкулезом;
• беременные;
• военнослужащие;
• работники сферы образования;
• лица с ВИЧ-инфекцией;
• пациенты, получающие лучевую, противоопухолевую, кортикостероидную, иммуносупрессивную терапию (т.е. люди с ослабленным иммунитетом);
• пациенты на гемодиализе;
• лица с заболеваниями, ослабляющими иммунитет (вирусные гепатиты, сахарный диабет, опухоли и пр.);
• люди, проживающие или мигрирующие из стран с очень высоким уровнем заболеваемости туберкулезом (регионы Юго-Восточной Азии, Западной части Тихого океана, страны Африки);
• больные профессиональными заболеваниями легких;
• наркоманы;
• лица, прибывшие из мест лишения свободы.

Метод IGRA проводят при сомнительной или положительной пробе Манту, диаскинтеста, а также при вираже туберкулиновых проб. Противопоказание к постановке реакции Манту и диаскинтеста является показанием к проведению квантиферонового теста. Его также выполняют через 6-8 недель после контакта с больным туберкулезом.

Подготовка

Метод диагностики туберкулеза посредством метода IGRA подразумевает применение иммуноферментного анализа, что означает необходимость соблюдения ряда правил. Кровь сдают строго натощак, как минимум за 10 часов до сдачи анализа прием пищи прекращают. Во избежание образования хилезной (насыщенной микрочастицами жира) сыворотки прием жирной пищи прекращают за 12 часов до теста.

Квантифероновый тест можно проводить в период обострения аллергии, после прививки – это не повлияет на уровень гамма-интерферона.

Кровь можно сдавать в любое время суток. Врачи не рекомендуют сдавать анализ при острых инфекциях, несмотря на то, что производитель тест-системы указывает на отсутствие их влияния на результат.

Расшифровка результатов

Результат квантиферонового теста зависит от того, какая концентрация гамма-интерферона. Если результат отрицательный, то это не факт, что в организме нет туберкулезной палочки. Иногда такие показатели присущи при:

• иммунодефиците;
• неправильной подготовке к анализу или нерациональном его проведении;
• самом раннем туберкулезе;
• заболевании детей, которым меньше 5-ти лет.

Чтобы оценить результат, нужно учитывать показатели всех трех пробирок. Отрицательным тест считают, если присущи следующие показатели:

• до 8-ми нг/мл маркеров в контрольной NIL пробирке;
• До 0,35-ти нг/мл в пробирке, где антиген;
• Выше 0,5-ти нг/мл (там, где добавлен митоген).

Верно оценить результат теста сможет только квалифицированный специалист.